在miRNA的研究中，经常需要验证miRNA与基因靶向关系。miRNA通过其种子序列（5’端第2-8个碱基）与mRNA的3’UTR区结合，促使细胞内沉默复合体介导的mRNA降解或抑制其翻译。基于此原理，可以将特定基因3'UTR区（或结合位点下游500bp）插入到荧光素酶报告基因载体luciferase的下游，并与miRNAmimics共同转染目的细胞。随后加入底物，检测荧光素酶活性的变化。如果荧光素酶活性下降，说明miRNA与靶基因的3'UTR区存在相互作用。

双荧光素酶报告基因检测用于验证miRNA与目标基因3'UTR相互作用的工作原理，主要包括以下几个步骤：首先利用生物信息学分析软件（如TargetScan、StarBase和miRanda等）分析特定靶基因的3'-UTR序列，预测是否存在miRNA结合位点。接着，将预测的靶基因3'-UTR序列插入到萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）的3'-UTR中。miRNA如与质粒中的插入序列结合，就会抑制萤火虫荧光素酶的翻译，从而导致荧光值降低。通过这一过程，双荧光素酶报告基因检测可以有效验证miRNA与靶基因3'UTR的相互作用，为研究miRNA的功能和调控网络提供重要工具。

尊龙凯时-人生就是博提供的双荧光素酶报告基因检测服务流程包括详细的材料准备和实验步骤：选择好HEK293细胞或其他特定细胞进行转染，使用合适的转染试剂（如HieffTrans® invitrosiRNA/miRNA Transfection Reagent）和报告基因检测试剂盒（Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit）。实验时需确认目的细胞的质粒瞬转效率，确保在细胞覆盖率达到70%左右时进行转染。转染后收集细胞样品，并进行相应的荧光素酶活性检测与数据分析。

在实验检测中，分为多个检测组进行对照，例如：mimics NC + 对照质粒 + 海肾内参（TK）；mimics + 3’UTR野生型质粒（WT） + 海肾内参（TK）等。实验预期结果是通过双荧光素酶报告基因检测，确定miRNA与靶基因3'UTR的相互作用，进而加速基础研究及药物筛选进程。

尊龙凯时-人生就是博为研究人员提供相关产品，包括双荧光素酶报告基因检测试剂（产品货号：11402ES），以及多种转染试剂，以满足不同实验需要。这些高质量的科研工具旨在助力科研人员在前沿生物医学研究领域取得更多突破。