什么是包被细胞培养瓶试剂?
包被试剂是一种用于处理细胞培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,旨在模拟细胞在生物体内的生长环境,从而促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更有效地支持细胞的生长和功能表现。本文将详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作中的注意事项,帮助您轻松提升细胞培养效果。
常见的包被试剂及使用方法
01 明胶(Gelatin)
CSP132 明胶常用于包被细胞培养板或培养皿,帮助细胞的贴壁和增殖。它具有良好的生物相容性和细胞黏附性。
适用细胞:胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。
特点:价格低廉,使用简便,能够提供良好的细胞附着支持。
使用浓度:1-20 mg/ml(即1 mg/ml-20 mg/ml)。包被体积:通常以完全覆盖培养瓶底部为标准,T-25瓶需25 ml,T-75瓶需75 ml。
包被条件:37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。接种细胞前需吸除多余的明胶溶液,并用PBS洗涤1-2次后进行接种。
02 多聚赖氨酸(PLL)
CSP073 多聚赖氨酸是一种相对分子量在70,000~300,000的细胞培养粘附剂,能有效促进细胞的粘附和贴壁。
适用细胞:神经元细胞、原代细胞、悬浮细胞等。
特点:通过静电作用增强细胞的附着能力,特别适合难以贴壁的细胞。
常用浓度:0.01%至0.1%(w/v),即0.1 mg/ml至1 mg/ml。包被条件:37°C孵育≥2小时,或4°C过夜,操作时须吸去多余溶液,并用无菌PBS冲洗1-2次。
03 重组人纤连蛋白(FN)
CSP044 重组人纤连蛋白是一种具多重生物学功能的细胞外基质蛋白,能够与多个细胞和基质成分结合,支持细胞的生长。
适用细胞:干细胞、间充质干细胞、内皮细胞、上皮细胞、肿瘤细胞和成纤维细胞。
特点:作为细胞培养基质,可以提高细胞贴壁率,增加细胞代谢水平,缩短细胞生长时间。
常用浓度:1 µg/cm²至10 µg/cm²。包被条件:37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。
04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)
CSP145 鼠尾胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白,适用于多种细胞类型的培养,能模拟细胞外基质环境。
适用细胞:上皮细胞、肝细胞、肌肉细胞等。
特点:可制备成清晰的凝胶,提供3D基质或涂层,促进细胞的贴壁和增殖。
常用浓度:1-5 µg/cm²,包被体积:T-25瓶需要25 ml去离子水加50 µl (1 mg/ml) 鼠尾胶原蛋白Ⅰ,放置于4°C过夜,吸出溶液后洗涤2-3次,随后加入细胞。
包被操作注意事项
1. 无菌操作:所有操作应在无菌条件下进行,以避免污染。
2. 均匀覆盖:确保包被试剂在培养瓶底部均匀分布,避免局部厚薄不均。
3. 浓度优化:根据不同细胞类型和实验需求调整包被试剂浓度。
4. 孵育时间:根据试剂和实验要求调整孵育时间,以确保充分的包被效果。
5. 储存条件:包被后的培养瓶可短期存放在4°C,但建议尽快使用,以确保最佳效果。
尊龙凯时-人生就是博,通过选择合适的包被试剂并遵循正确的包被步骤,可以显著提高细胞贴附和生长,为后续实验提供可靠的细胞模型。